극저온 전자 현미경은 고정 및 염색 없이 세포 및 생물학적 분자를 관찰할 수 있는 방법으로 확립되었습니다. 최근 하드웨어와 소프트웨어의 급속한 발전으로 인해 이 현미경 기술은 원자 규모의 구조 분석 방법으로 점점 더 중요해지고 있습니다. 또한, 결정화 없이 막 단백질을 분석할 수 있는 기술이 개발되어 약물 발견을 위한 저온 전자 현미경의 사용이 증가하고 있습니다. 따라서 대학과 연구실에 극저온 전자현미경(cryo-EM)의 설치가 크게 가속화되고 있다. cryo-EM 사용자의 요구를 충족시키기 위해 JEOL은 장기간에 걸쳐 단일 입자 분석을 위한 이미지 데이터를 자동으로 수집하는 새로운 cryo-EM "CRYO ARM™ 200"을 개발했습니다.
특징
자동 검체 교환 시스템
시스템은 샘플을 액체 질소 온도로 냉각시키는 시편 스테이지와 냉각된 샘플을 자동으로 cryo 스테이지로 이송하는 cryo-transfer 시스템으로 구성됩니다. 액체 질소는 필요에 따라 액체 질소 탱크에 자동으로 공급됩니다. 이 자동화 시스템은 최대 12개의 샘플을 저장하고 임의의 하나 이상의 샘플을 교환하는 반면 나머지 샘플은 시편 스테이지와 시편 교환 시스템 사이에서 냉각된 상태로 유지됩니다. 이러한 고유한 기능을 통해 현미경 검사 일정을 유연하게 조정할 수 있습니다.
콜드 필드 방출 건(Cold FEG)
Cold FEG는 에너지 확산이 매우 작은 고휘도 전자빔을 생성하여 높은 일관성을 제공합니다. 따라서 CRYO ARM™ 200은 고해상도, 고대비 이미징을 구현합니다.
인칼럼 에너지 필터(오메가 필터)
인컬럼 에너지 필터(오메가 필터)가 장착된 CRYO ARM™ 200은 에너지 필터링된 이미지와 에너지 손실 스펙트럼을 획득합니다. 현미경으로 얻은 무손실 이미지는 색수차가 감소된 고대비를 제공합니다.
단일 입자 분석을 위한 자동 이미지 수집 소프트웨어
CRYO ARM™ 200은 자동화 소프트웨어를 통합합니다. 이 소프트웨어를 사용하면 단일 입자 분석 이미지를 효율적으로 획득하기 위해 시편 그리드의 구멍을 자동으로 감지할 수 있습니다.
구멍 없는 위상판 *1
이 독특한 위상판은 원래 낮은 대비만 제공하는 생물학적 표본의 높은 대비에 적합합니다.
자동 조정 기능 *2
자동 초점, 자동 코마 없는 정렬, 자동 평행 빔 조명 및 기타 자동 조정을 사용할 수 있어 최적의 조건에서 이미지를 획득할 수 있습니다.
선택적 단위.
하단 마운트 카메라로 획득한 이미지가 사용됩니다.
제품 사양
주요 악기
| 전자총 | 콜드 필드 방출 건(Cold FEG) |
|---|---|
| 가속 전압 | 200kV |
| 에너지 필터 | 컬럼 내 오메가 에너지 필터 |
| 최대 시편 기울기 각도 | ± 70 ° |
쇼트키 전계 방출 건은 선택적으로 구성할 수 있습니다.
시편 스테이지 / 자동 시편 교환 시스템
| 표본 단계 | |
|---|---|
| 냉각수 | 액체 질소 자동 액체 질소 충전 시스템 내장 |
| 시편 냉각 온도 | 100K 이하 |
| 온도 측정 위치 | 시편, Cryo-shield, LN2 탱크 |
| 표본의 움직임 | |
| X, Y | 모터 드라이브(움직임: ±1mm) 압전 소자(이동: ±0.5μm) |
| Z | 모터 드라이브(움직임: ±0.2mm) |
| 틸트-X | 모터 드라이브(틸트: ±70°) |
| 시편 평면 내 회전 | 0° 또는 90° |
| 표본 교환 시스템 | 에어록 자동화된 cryo-transfer 시스템 내장 |
| 냉각 온도 (시료교환실) |
105K 이하 |
| 표본 교환 카트리지 | 한 번에 최대 4개의 표본을 변경할 수 있습니다. |
| 견본 주차 단계 | 최대 12개의 표본을 보유할 수 있습니다. |
카탈로그 다운로드
CRYO ARM™ 200(JEM-Z200FSC) 전계 방출 Cryo-Electron
어플리케이션
애플리케이션 JEM-Z200FSC
기존 전자 단층 촬영을 넘어 3D로 생물학적 샘플 탐색
Aberration Corrected STEM에서 EELS 및 XEDS에 의한 원자 분해능 원소 매핑
갤러리 (Gallery)
Innexin-6 갭 접합 채널
실험 조건
샘플: Innexin-6(Caenorhabditis elegans)
현미경: Gatan K300가 장착된 CRYO ARM™300(2kV CFEG)
이미지 수집에 사용된 소프트웨어: JADAS(1974 이미지)
입자 수: 91,613(초기 픽업), 37,767(3D 재구성용)
이미지 분석에 사용된 소프트웨어: Relion3
분해능: 3.0Å(FSC = 0.143에서)
A. 오시마 교수(나고야 대학) 제공 샘플
아포페리틴
cryoEM이 달성한 최고 분해능 1.53Å 2019.02
마우스 아포페리틴
페닐알라닌
메티오닌 황 원자
트립토판
광학 기능: Cold FEG 300kV 및 20eV 슬릿 폭의 Ω형 에너지 필터
검출기: Gatan K2(이미지 픽셀 크기: 0.495 Å, mag x100,000)
그리드: Quantifoil 1.2/1.3 Cu 200 메쉬, 데이터 수집 전 3일 동안 오토로더에 보관됨
현미경 사진 수: 974시간 동안 수집된 24개, 이미지 분석에 사용된 840개
입자 수: 최종 재구성에 사용된 120,295개
소프트웨어: RELION 3.1b, CTFFIND4
분해능: 1.53 Å(B 계수: 47)
참고: 처음 56개의 이미지만으로 1.76 Å 해상도의 맵이 생성되었습니다(B 계수: 45).
Yanagisawa, Danev & Kikkawa @Tokyo University의 마우스 아포페리틴 플라스미드
카토, 마키노, 나카네, 테라하라, 카네코, 시미즈, 모토키, 이시카와, 요네쿠라, 난바 2019.02 (EMDB-9865)
β-갈락토시다아제
β-갈락토시다제 2.43 Å 분해능 CRYO ARM™
β-갈락토시다제 2.43 Å 분해능 CRYO ARM™
샘플 :
PETG와 β-갈락토시다제현미경:
CRYO ARM™(Schottky 200kV) / K2 서밋이미지 수:
JADAS에서 2,500일 동안 3건이미지 픽셀 크기:
0.8Å/픽셀입자 이미지 수:
350,000(초기 픽업), 88,564(최종 3D 재구성용)소프트웨어:
Motioncor2, Gctf, Gautomatch, Relion2.0총 복용량:
70e-/Å2(70프레임(0.2초/프레임 x 14초)
데이터: 오사카 대학 Dr. T. Kato 및 Dr. K. Namba 제공, 2017년 XNUMX월
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글로벌 셔터 및 높은 프레임 속도(58fps/전체 픽셀 모드)를 통해 동적 관찰 중에 아티팩트가 적은 이미지 시리즈 획득이 가능합니다.
"SightX" 카메라 시스템 제어 소프트웨어는 사용자 친화적인 작동을 제공합니다.
