단일 입자 분석을 위한 헬륨 냉각 극저온 전자 현미경의 적용

단일 입자 분석은 결정 없이 고해상도로 생물학적 분자의 3차원 구조를 결정할 수 있습니다. 전자현미경에서 고해상도 구조 분석의 주요 장애물은 생체 시료의 방사선 손상이며, 시료를 극저온으로 냉각하면 방사선 손상의 영향을 줄일 수 있습니다. 단일 입자 분석에서도 조사 손상을 줄여 더 높은 해상도의 구조를 달성하기 위해 단일 입자 분석을 위한 액체 헬륨 냉각 스테이지가 있는 새로운 저온 전자 현미경이 개발되었으며 단일 입자 분석을 사용하는 두 가지 연구에서 이를 활용했습니다. 적용을 위해 액체 헬륨 냉각 단계를 사용하여 관형 결정에서 고해상도 이미지 수집을 위해 개발된 샘플 준비 기술을 약간 수정했습니다. 첫 번째 적용은 Thermus thermophilus에서 GroEL-GroES-기질 복합체의 구조를 결정하는 것이었습니다. 우리는 복합체 내부의 폴딩 기판에 해당하는 밀도를 관찰했습니다. 두 번째 적용은 막 단백질, 인간 적혈구 밴드 XNUMX의 관형 결정으로부터 XNUMX차원 재구성이었습니다. 이 목적을 위해 나선형 대칭을 갖는 튜브에 대한 단일 입자 분석의 변형인 반복 나선형 실제 공간 재구성이 사용되었습니다. 이 두 가지 예는 단일 입자 분석으로 광범위한 대상의 XNUMX차원 구조를 분석할 수 있음을 명확하게 보여줍니다.