정량적 NMR을 해보자
8 문제
이전 XNUMX개 호에서는 정량적 NMR의 배경을 포함한 개요를 소개했습니다. 이번 호부터는 실용적인 내용을 소개하겠습니다.
예비
실제로 정량적 NMR 측정을 수행하기 전에 사전에 몇 가지 준비가 필요합니다. 이는 (1) 정량 측정 방법 선택(내부 표준 방법 또는 외부 표준 방법), (2) 시료 준비 조건 결정(qNMR에 대한 용매 및 참조 표준 물질 선택, 시료 용액의 안정성), (3) 정량화에 적합한 신호가 나타나는지 확인합니다. 1H-NMR 스펙트럼. 여기서는 정량적 측정방법의 선택에 대해 간략하게 소개하겠습니다.
내부 표준 방법의 경우 qNMR에 대한 참조 표준은 분석물질과 동일한 용액에서 준비됩니다. 외부 표준 방법의 경우 qNMR 및 분석물질에 대한 참조 표준이 별도로 준비됩니다. 어떤 방법을 선택할지 결정할 때 고려해야 할 점은 검체의 정확성이나 회수율 중 어느 쪽이 더 높은지 여부입니다. 정확성을 강조하고 싶다면 내부 표준법을 권장합니다. 반면, 단일 분리 물질인 귀금속을 분석하는 경우에는 외부 표준 방법이 더 나을 것입니다.
그림 2 내부표준과 외부표준방법
정량적 NMR의 분석 계획
내부 표준 방법 또는 외부 표준 방법을 사용한 정량적 NMR에는 세 단계가 있습니다.
시료 준비 → NMR 측정 → 분석.
그림 1 qNMR 분석 흐름도
1) 내부표준법(Fig.3 내부표준법 절차)
샘플 준비: 사용할 저울의 정밀도를 확인하고 qNMR에 대한 참조 표준물질과 분석물질의 무게를 정밀하게 측정합니다. 동일한 로트에서 3개의 샘플을 생성하는 것이 좋습니다.
NMR 측정: 정량화를 위해 최적화된 조건에서 1H 측정을 수행합니다. 주목해야 할 매개변수 중 하나는 펄스 반복 시간 설정입니다. T1(종방향 이완 시간)을 기준으로 충분히 긴 반복 시간을 설정합니다. 각 qNMR 샘플에 대해 XNUMX번의 측정을 수행하는 것이 좋습니다.
분석: FID 처리 시 일부 처리가 자동으로 이루어질 수 있으나, 육안으로 확인하는 것이 좋습니다.
그림 3 내부표준법 절차
2) 외부 표준법(그림 4 외부 표준법 절차)
샘플 준비: 사용할 저울의 정확성을 확인하고 qNMR에 대한 참조 표준물질과 분석물질을 별도로 정밀하게 계량합니다. 이 경우 정량화를 위한 참조 표준의 정확한 몰 농도를 아는 것이 중요합니다.
NMR 측정: 정량적 조건에서 측정을 실시하지만, 기준액의 스펙트럼과 분석용 시료액의 스펙트럼을 비교하기 위해서는 온도, 펄스폭 측정 등의 교정이 필요합니다.
분석 : 내부표준법과 마찬가지로 가공 후 육안검사가 필요하다. 계산할 때 각 qNMR 샘플의 측정 매개변수에 따라 계산에는 교정 계수가 포함되어야 합니다.
그림 4 외부 표준법 절차
